Porque enviamos os nossos produtos para a Janoshik (e o que encontraram)

Na semana passada recebemos os nossos primeiros três relatórios de teste independentes da Janoshik Analytical. Os resultados estão agora publicamente disponíveis — e pode verificar cada número por si.

Eis porque optámos por investir em testes independentes por terceiros, o que os relatórios mostraram e o que isso significa para investigadores que encomendam connosco.

O problema dos testes internos

Todos os fornecedores de peptídeos afirmam “testado por terceiros” ou “verificado por HPLC.” Mas, quando pede o certificado, o que normalmente recebe é um documento gerado pelo próprio vendedor. Não há forma de verificar de modo independente se o teste foi realmente realizado, se o número de lote corresponde, ou se o número de pureza não foi editado no Photoshop.

Efetuamos HPLC e espectrometria de massa em cada lote antes de ser enviado. Assumimos esses resultados. Mas também reconhecemos que pedir-lhe que confie nos nossos próprios testes é pedir muito — especialmente quando está a avaliar um novo fornecedor.

Este é um problema sistémico na indústria dos peptídeos de investigação. Um estudo de 2023 publicado na JAMA Network Open (Cohen et al.; PMID: 37594764) testou 57 amostras de peptídeos compradas como químicos de investigação e constatou que apenas 52% continham a quantidade rotulada dentro de uma precisão de 10%. Algumas amostras não continham qualquer peptídeo detetável. O estudo concluiu que a verificação analítica independente é essencial para investigadores que necessitam de materiais experimentais fiáveis.

Essa conclusão é consistente com o que a comunidade de investigação sabe anedoticamente há anos: os COAs internos de fornecedores de peptídeos são tão fiáveis quanto o fornecedor que os emite. Sem verificação independente, não há forma de distinguir um certificado legítimo de um fabricado.

Porquê a Janoshik?

A Janoshik Analytical tem sido o laboratório independente de testes de peptídeos de referência na comunidade de investigação há mais de uma década. O seu portal público de verificação recebe mais de 100,000 visitantes mensais de investigadores que avaliam fornecedores. Cada relatório inclui um código QR que é invalidado se o documento for alterado — o que significa que não é possível falsificar um certificado Janoshik.

Escolhemo-los porque queríamos que os nossos clientes pudessem verificar as nossas afirmações sem dependerem apenas da nossa palavra. Os relatórios ficam no website da Janoshik, não no nosso. Não temos qualquer controlo sobre o que encontram ou publicam.

Várias características tornam os testes da Janoshik particularmente credíveis para a comunidade de investigação:

• Teste cego de amostras: As amostras são submetidas apenas com identificadores de produto — o laboratório não conhece a identidade do fornecedor nem a pureza declarada antes de realizar a análise.
• Portal público de verificação: Cada relatório recebe um URL único em verify.janoshik.com. Qualquer pessoa pode verificar o relatório sem nos contactar.
• Códigos QR invioláveis: O código QR em cada relatório liga aos dados originais. Se mesmo um único carácter do relatório for alterado, o código QR deixa de validar.
• Metodologia padronizada: A análise por HPLC utiliza tipos de coluna, fases móveis e condições de gradiente consistentes em todos os testes de peptídeos, tornando os resultados comparáveis entre fornecedores.

Compreender os métodos de teste

Para investigadores que avaliam COAs — sejam os nossos ou os de qualquer outra entidade — ajuda compreender o que cada teste mede de facto e o que não mede.

Pureza por HPLC (High-Performance Liquid Chromatography): Esta é a principal métrica de qualidade para peptídeos de investigação. A HPLC separa a amostra nos seus componentes com base na sua interação com uma fase estacionária e um gradiente de fase móvel. A percentagem de pureza representa a área do pico do peptídeo-alvo relativamente à área total integrada dos picos. Um resultado de 99.766% significa que 99.766% do material absorvente de UV na amostra é o peptídeo-alvo — os restantes 0.234% consistem em impurezas relacionadas com a síntese (sequências de deleção, formas oxidadas, subprodutos de desproteção).

O que a HPLC não lhe diz: conteúdo de peptídeo (quanto da massa liofilizada total é peptídeo ativo versus contra-íons e água), confirmação de identidade (a HPLC por si só não consegue distinguir entre peptídeos de hidrofobicidade semelhante), ou a presença de contaminantes que não absorvem UV.

Espectrometria de massa (MS): Confirma a identidade molecular medindo o peso molecular exato do peptídeo. Para um peptídeo corretamente sintetizado, a massa observada deve corresponder à massa teórica dentro da tolerância do instrumento (tipicamente +/- 1 Da para ionização por electrospray). A espectrometria de massa deteta problemas que a HPLC pode não detetar — como substituições de aminoácidos que, por acaso, eluem no mesmo tempo de retenção que o peptídeo-alvo.

Análise gravimétrica (peso da amostra): Mede a massa real de peptídeo liofilizado no frasco. Esta é comparada com o peso de enchimento rotulado. Um ligeiro sobreenchimento (como o resultado de Selank de 11.56 mg num rótulo de 10 mg) é comum e aceitável — proporciona uma margem para perda de pó durante a reconstituição. Um subenchimento significativo (como o resultado de Epitalon de 45.31 mg num rótulo de 50 mg) indica um problema de precisão de enchimento que precisa de ser tratado com o fabricante.

O que encontraram

Enviámos três produtos do nosso inventário atual para teste cego:

Produto	Rotulado	Peso real	Pureza por HPLC	Relatório
Ipamorelin	10mg	10.02mg	99.766%	Ver relatório
Selank	10mg	11.56mg	99.788%	Ver relatório
Epitalon	50mg	45.31mg	98.005%	Ver relatório

Dois produtos regressaram com pureza acima de 99.7% e pesos precisos ou sobreenchidos. O resultado do Epitalon de 98.005% está abaixo do nosso limiar declarado — estamos a tratar deste ponto com o nosso fornecedor para o próximo lote.

Publicamos o resultado do Epitalon exatamente como a Janoshik o comunicou. Transparência significa mostrar todos os números, não apenas os favoráveis.

O que os números significam em contexto

Para investigadores que avaliam estes resultados face ao mercado mais amplo:

• Ipamorelin a 99.766%: Excede o limiar de ≥98% comummente citado como grau de investigação. O peso de enchimento de 10.02 mg está dentro de 0.2% da quantidade rotulada — bem dentro da tolerância de fabrico aceitável para peptídeos liofilizados.
• Selank a 99.788%: A pureza mais elevada das três amostras. O sobreenchimento de 11.56 mg (15.6% acima do rótulo) significa que os investigadores recebem mais peptídeo ativo por frasco. O sobreenchimento é uma prática deliberada de fabrico para assegurar que a quantidade rotulada esteja sempre disponível depois de contabilizada a aderência do pó às paredes do frasco durante a reconstituição.
• Epitalon a 98.005%: Abaixo do nosso padrão interno de ≥99%, mas ainda acima do limiar de 98% para grau de investigação. O teor de impurezas de ~2% poderia incluir sequências truncadas (variantes des-Ala ou des-Glu) e metionina oxidada. O enchimento de 45.31 mg (9.4% abaixo do rótulo) é um problema de precisão de enchimento que estamos a corrigir com o nosso fabricante. Não estamos a retirar o inventário atual de Epitalon da venda — a pureza é de grau de investigação — mas vamos exigir ao fornecedor especificações de enchimento mais rigorosas no futuro.

Como ler um COA de peptídeo

Quer esteja a avaliar a CertaPeptides ou qualquer outro fornecedor, saber ler criticamente um Certificado de Análise protege o seu investimento em investigação. Eis o que verificar:

1. Método de pureza: Procure “RP-HPLC” (HPLC de fase reversa). Alguns COAs indicam “pureza por TLC” (cromatografia em camada fina), que é um método menos preciso e inadequado para análise quantitativa de peptídeos.
2. Confirmação do peso molecular: O COA deve incluir um resultado de MS que confirme o peso molecular esperado. Sem isto, não tem verificação de identidade — apenas uma percentagem de pureza para uma substância não identificada.
3. Número de lote: Cada COA deve fazer referência a um lote específico. Se encomendar o mesmo produto duas vezes e receber COAs com números de lote idênticos mas datas de encomenda diferentes, isso é um sinal de alerta — o fornecedor pode estar a reutilizar um único COA em vários lotes.
4. Aparência e solubilidade: A caracterização física básica confirma que o produto foi realmente testado. Um COA que lista apenas a pureza, sem aparência, solubilidade ou outras propriedades físicas, pode ter sido gerado a partir de um modelo em vez de ser específico do lote.
5. Contra-íon: Verifique se o peptídeo é fornecido como sal TFA, sal acetato ou base livre. Isto afeta o conteúdo líquido de peptídeo e pode ser relevante para ensaios sensíveis.
6. Verificação independente: Os COAs mais credíveis vêm de, ou são verificáveis através de, laboratórios independentes como a Janoshik. Um certificado que pode cruzar com uma base de dados pública é fundamentalmente mais fiável do que um que não pode.

Como verificar estes resultados por si

Cada relatório Janoshik inclui um código de verificação único. Eis como verificar:

1. Clique em qualquer ligação “Ver relatório” acima — abre no website da Janoshik, não no nosso
2. Digitalize o código QR no relatório para verificar que não foi modificado
3. Verifique a percentagem de pureza, o peso da amostra e a metodologia de teste

Se um vendedor remover ou ocultar o código QR num certificado Janoshik, isso é um sinal de alerta. Relatórios legítimos incluem sempre marcadores de verificação completos.

O nosso programa de testes contínuo

Estes três produtos são o início. Planeamos enviar lotes adicionais para a Janoshik de forma contínua, priorizando os nossos produtos de maior volume. Cada relatório será publicado publicamente — tanto na nossa página de verificação como no portal público da Janoshik.

Também nos candidatámos ao programa Distinctive Branding da Janoshik, que acrescenta o nosso logótipo a todos os relatórios na sua página de listagens públicas, e à colocação Premium Top Page para máxima visibilidade.

A nossa lista de prioridades de teste para lotes futuros inclui:

• BPC-157 e TB-500 — os nossos peptídeos de investigação de maior volume
• Semaglutide e tirzepatide — peptídeos incretínicos em que a verificação de pureza é particularmente importante, dados os achados de Cohen et al. (2023)
• GHK-Cu — peptídeo de cobre em que a precisão da quelação metálica afeta a atividade biológica

Se quiser ver produtos específicos testados a seguir, informe-nos. Estamos a construir este programa de verificação com base no que importa aos investigadores.

Porque a transparência importa para peptídeos de investigação

O mercado de peptídeos de investigação opera com supervisão regulatória mínima em comparação com compostos de grau farmacêutico. Isto cria uma assimetria de informação: os fornecedores sabem exatamente o que está nos seus produtos, mas os compradores têm de confiar nessa informação. Os testes independentes invertem essa dinâmica — dão aos investigadores acesso aos mesmos dados analíticos que os fornecedores têm, verificados por um terceiro neutro.

Publicamos todos os resultados Janoshik, incluindo os que ficam aquém dos nossos padrões internos, porque transparência seletiva não é transparência. Se publicássemos apenas resultados favoráveis, o exercício não seria mais fiável do que COAs emitidos por nós próprios. O resultado do Epitalon demonstra este princípio: uma pureza de 98% com subenchimento não é o número que queríamos publicar, mas é o número que a Janoshik encontrou, e publicá-lo é a única forma de tornar o programa de testes credível.

Para investigadores que avaliam qualquer fornecedor de peptídeos — incluindo nós — a verificação independente é o sinal de qualidade mais fiável disponível. Incentivamo-lo a verificar os nossos relatórios Janoshik, compará-los com os resultados de outros fornecedores no mesmo portal e tomar decisões de abastecimento com base em dados verificáveis em vez de afirmações de marketing.

Referências

1. Cohen PA, et al. (2023). Quantity of Semaglutide, Tirzepatide, and Retatrutide in Products Sold as Research Chemicals. JAMA Network Open. 2023;6(8):e2330490. PMID: 37594764. — Este estudo testou 57 amostras de peptídeos de investigação e encontrou discrepâncias significativas de pureza e dosagem, salientando a importância da verificação independente por terceiros.
2. Sikiric P, Seiwerth S, Rucman R, Turkovic B, et al. (2011). Stable gastric pentadecapeptide BPC 157: novel therapy in gastrointestinal tract. Current Pharmaceutical Design, 17(16), 1612-1632. PMID: 21548867.
3. Pickart L, Vasquez-Soltero JM, Margolina A. (2015). GHK Peptide as a Natural Modulator of Multiple Cellular Pathways in Skin Regeneration. BioMed Research International, 2015, 648108. PMID: 26236730.

Todos os produtos mencionados destinam-se exclusivamente a fins de investigação.